Korelacja ekspresji antygenów H / LeY / LeB z przeżywalnością u pacjentów z rakiem płuca ad

Posturgiczny stan patologiczny każdego nowotworu sklasyfikowano zgodnie z układem przerzutowo-węzłowo-przerzutowym (TNM) 14 – to jest przez jego klasyfikację patologiczną (stadium I, II lub choroba IIIA), obecność i stopień przerzutów do węzłów chłonnych (N0 N1 lub N2) i rozmiar guza (T1, T2 lub T3). Ponieważ duża liczba źle zdefiniowanych czynników bierze udział w późnym stadium raka płuc (stadium IIIB i IV – tj. Ze stanem gorszym niż N3 i T4), wpływ pojedynczego czynnika, takiego jak dodatni wynik MIA, może być znacznie osłabiony i zasłonięte. Ponadto, ponieważ pięcioletni wskaźnik przeżywalności u pacjentów z chorobą stopnia IIIB i przerzutami N3 wynosi od 0 do 5 procent, rozważaliśmy analizę przeżycia takich pacjentów bezcelowo w kontekście niniejszego badania, a zatem wykluczono 52 pacjentów ze stadium Choroba IIIB lub IV. Ponieważ średnia długość życia japońskich mężczyzn i kobiet wynosi odpowiednio 78 i 81 lat, przebadaliśmy tylko pacjentów w wieku od 32 do 73 lat, wykluczając w ten sposób 10 pacjentów powyżej 74 roku życia. Wykluczyliśmy również następujących pacjentów: 26 pacjentów otrzymujących przedoperacyjną chemioterapię lub radioterapię; 5 pacjentów, którzy zmarli na powikłania po operacji ( śmierć operacyjna ); 6 pacjentów z dwiema lub więcej formami raka; i 3 pacjentów, którzy zmarli w wyniku wypadków drogowych lub mieli poważną chorobę inną niż rak (tj. cukrzyca). Podsumowując, przebadaliśmy 149 pacjentów w wieku od 32 do 73 lat z chorobą do stadium IIIA (tj. Aż do N2 i T3) spośród 251 wstępnie rozważanych pacjentów.
Badanie histopatologiczne i immunohistologiczne
Nowotwory płuc zostały sklasyfikowane histologicznie zgodnie z kryteriami Światowej Organizacji Zdrowia. 15 Próbki guza z pierwszorzędowym guzem utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie zbadano immunohistologicznie za pomocą techniki złożonej z awidyny-biotyny, jak następuje. Sekcje nowotworowe (o grubości 4 .m) namoczono w ksylenie w celu usunięcia parafiny i odwodniono w gradiencie etanolu. Endogenna aktywność peroksydazy została zablokowana przez traktowanie sekcji 0,3% nadtlenkiem wodoru przez 20 minut. Skrawki przemywano 50 mM buforem TRIS (pH 7,4) przez pięć minut, inkubowano z normalną surowicą kozią przez dwie godziny w temperaturze pokojowej i poddawano ekspozycji przez noc na przeciwciało monoklonalne MIA-15-5 (stężenie, 10 ug na mililitr). Następnie płukano w 50 mM buforze TRIS przez 20 minut, traktowano biotynylowanym kozim antymoczowym roztworem IgM przez 2 godziny, płukano przez 20 minut i traktowano solą fizjologiczną buforowaną fosforanem zawierającą kompleks awidyna-biotyna przez godzinę. Na koniec, płukano je w 50 mM buforze TRIS przez 30 minut, inkubowano z roztworem substratu zawierającym 3 , 3 -diaminobenzydynę przez minutę, przemywano wodą i słabo kontrastowano hematoksyliną. Skrawki inkubowane z mysim IgM zastosowano jako kontrole negatywne.
Biotynylowane kozie antymonu IgM, awidynę i biotynę zakupiono od Vectastain (Burlingame, CA). Barwienie zdefiniowano jako pozytywne, jeśli błony lub cytoplazma ponad 5 procent komórek nowotworowych zabarwiono. W większości pozytywnych przypadków ponad 30 procent populacji komórek nowotworowych zostało zabarwionych. Wszystkie szkiełka analizowano bez wiedzy klinicznej o pacjentach.
Analiza statystyczna
Krzywe przeżycia obliczono zgodnie z metodą Kaplana i Meiera, 16 i różnice w przeżyciu między podgrupami pacjentów porównano z testem log-rank Mantela.17 Przeżywalność mierzono w dniach, zaczynając od dnia operacji
[przypisy: usg kolana kraków, citotrop, stomatolog na nfz kraków ]