Mutacje bzdur w genie BCS1L jako przyczyna zespołu Björnstad ad 5

Dwie inne zgłoszone mutacje związane z niedoborem kompleksu III i zespołem GRACILE, a także mutacja CIII, wpływały na sekwencje sortowania; przez uniemożliwienie BCS1L dotarcia do mitochondrialnej błony wewnętrznej, mutacje te mogą również być funkcjonalnie zerowymi allelami. Każdy pacjent z zespołem Björnstada nosił co najmniej jeden allel, który według przewidywań miał częściową funkcję. Zlokalizowaliśmy pięć mutacji BCS1L w obrębie domeny AAA na trójwymiarowej strukturze (Figura 2D) RuvB Escherichia coli 20, która ma najwyższą homologię sekwencji z BCS1L wszystkich domen AAA. 26 Trzy mutacje związane z niedoborem kompleksu III i zespołem GRACILE , w tym mutacja missense (S277N) w domenie Walker B, 27 zmienionych reszt, które bezpośrednio oddziałują z magnezem lub ATP, odkrycie, które sugerowało, że te defekty osłabiają wiązanie nukleotydów lub hydrolizę. W przeciwieństwie do tego, mutacje w resztach 302 i 306 u pacjentów z zespołem Björnstad a zmieniły zewnętrzną twarz domeny AAA, miejsce, które sugerowało, że te wady wpływają na interakcje pomiędzy BCS1L i innymi białkami.
Analiza immunohistochemiczna
Rysunek 3. Rysunek 3. Ekspresja BCS1L we włosach i uszach mitochondriów. Panel A pokazuje konfokalne mikroskopowe obrazy fragmentów mieszków włosowych z normalnej ludzkiej skóry głowy barwionych przeciwciałami dla białka rdzeniowego (składnik kompleksu III) i BCS1L oraz z dichlorowodorkiem 4., 6-diamidyno-2-fenyloindolu (DAPI) dla barwienie jądrowe. W panelu B, lekkie mikrografie immunostablinowanych (ciemnobrązowych) normalnych mysich sekcji ucha wewnętrznego pokazują rozstępy naczyniowe i komórki rzęsate.
Zbadano ekspresję kompleksu III za pomocą analizy immunohistochemicznej z użyciem przeciwciał specyficznych dla BCS1L i białka rdzeniowego 1, składnika kompleksu III. Koncentryczne warstwy bogatych w mitochondria komórek z obfitymi ilościami BCS1L i rdzeniowego białka były najbardziej widoczne w brodawki skórnej (Figura 3A), ale także otaczały trzon włosa na całej długości mieszka w skrawkach skóry normalnej ludzkiej skóry głowy. W uchu wewnętrznym myszy przeciwciała przeciwko BCS1L i białku rdzeniowemu wytworzyły silne immunobarwienie w komórkach rzęsatych i naczyniach krwionośnych strusich (Figura 3B). Chociaż tkanki, w których wyrażano te białka, to te, które biorą udział w zespole Björnstad, BCS1L był również wysoce eksprymowany w tkankach serca i mózgu (danych nie pokazano).
Ekstrakcja mitochondrialna
Ryc. 4. Ryc. 4. Supertompleksowe półprodukty znalezione w mitochondrialnych ekstraktach od pacjentów z prawidłowymi limfocytami (WT), limfocytami z mutacjami w zespole Björnstad (BS) i limfocytami z mutacjami CIII. W panelu A przeciwciała przeciwko BCS1L wyznakowały odrębne kompleksy, gdy mitochondria zostały przygotowane z lub bez magnezu i ATP lub .S-ATP. W panelu B, Western blot sondowane przeciwciałami z rdzeniem białka wykazują półprodukty respirabilne o wysokiej masie cząsteczkowej. Western bloty sondowane przeciwciałami przeciwko białku Rieske Fe / S wykryły niezwiązane białko Rieske Fe / S w zmutowanym, ale nie w limfocytach typu dzikiego. Panel C pokazuje schemat montażu respirasomu i wpływ mutacji BCS1L. Heksameryczny pierścień monomerów BCS1L staje się zdolny do wprowadzania białka Rieske Fe / S do prekursorów do złożonych dimerów III poprzez hydrolizę ATP (ADP oznacza dwufosforan adenozyny i fosforan nieorganiczny Pi)
[więcej w: wdrożenia magento, pierścień landolta, alprazolam ]
[przypisy: probolan, dekstran, hostessy fordanserki ]
[podobne: pierścień landolta, hydrokortyzon maść, przeglądarka na leczenie uzdrowiskowe ]